ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ ടെക്നോളജി ആമുഖം

ⅠNയൂക്ലിക് ആസിഡ്iആമുഖം

ന്യൂക്ലിക് ആസിഡിനെ deoxyribonucleic acid (DNA), ribonucleic acid (RNA) എന്നിങ്ങനെ തിരിച്ചിരിക്കുന്നു.ഡിഎൻഎ പ്രധാനമായും ന്യൂക്ലിയസ്, മൈറ്റോകോണ്ട്രിയ, ക്ലോറോഫോം എന്നിവയിൽ കേന്ദ്രീകരിച്ചിരിക്കുന്നു, അതേസമയം ആർഎൻഎ പ്രധാനമായും സൈറ്റോപ്ലാസത്തിലാണ് വിതരണം ചെയ്യുന്നത്.ജീൻ എക്സ്പ്രഷൻ്റെ ഭൗതിക അടിസ്ഥാനമെന്ന നിലയിൽ, തന്മാത്രാ ജീവശാസ്ത്ര ഗവേഷണത്തിലും ക്ലിനിക്കൽ തന്മാത്രാ രോഗനിർണയത്തിലും ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ വളരെ പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നു.ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കലിൻ്റെ ഏകാഗ്രതയും പരിശുദ്ധിയും തുടർന്നുള്ള പിസിആർ, സീക്വൻസിംഗ്, വെക്റ്റർ നിർമ്മാണം, എൻസൈം ദഹനം, മറ്റ് പരീക്ഷണങ്ങൾ എന്നിവയെ നേരിട്ട് ബാധിക്കും.

Ⅱ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കലും ശുദ്ധീകരണ രീതിയും 

① ഫിനോൾ/ക്ലോറോഫോം വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ രീതി

ഡിഎൻഎ വേർതിരിച്ചെടുക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു ക്ലാസിക്കൽ രീതിയാണ് ഫിനോൾ/ക്ലോറോഫോം എക്‌സ്‌ട്രാക്ഷൻ, ഇത് പ്രധാനമായും രണ്ട് വ്യത്യസ്ത ഓർഗാനിക് ലായകങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച് സാമ്പിളുകൾ കൈകാര്യം ചെയ്യുന്നു, ഡിഎൻഎ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് ജലത്തിൻ്റെ ഘട്ടത്തിൽ ലയിക്കുന്നു, ഓർഗാനിക് ഘട്ടത്തിൽ ലിപിഡുകൾ, രണ്ട് ഘട്ടങ്ങൾക്കിടയിലുള്ള പ്രോട്ടീനുകൾ.ഈ രീതിക്ക് കുറഞ്ഞ ചെലവ്, ഉയർന്ന പരിശുദ്ധി, നല്ല പ്രഭാവം എന്നിവയുടെ ഗുണങ്ങളുണ്ട്.പോരായ്മകൾ സങ്കീർണ്ണമായ പ്രവർത്തനവും ദീർഘകാലവുമാണ്.

② ട്രൈസോൾ രീതി

ട്രൈസോൾ രീതി ആർഎൻഎ വേർതിരിച്ചെടുക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു ക്ലാസിക്കൽ രീതിയാണ്.ക്ലോറോഫോം ഉപയോഗിച്ച് സെൻട്രിഫ്യൂഗേഷനുശേഷം ട്രൈസോൾ രീതി ജലീയ ഘട്ടം, ഓർഗാനിക് ഘട്ടം എന്നിങ്ങനെ തിരിച്ചിരിക്കുന്നു, അതിൽ ആർഎൻഎ ജലീയ ഘട്ടത്തിൽ അലിഞ്ഞുചേരുന്നു, ജലീയ ഘട്ടം ഒരു പുതിയ ഇപി ട്യൂബിലേക്ക് മാറ്റുന്നു, ഐസോപ്രോപനോൾ ചേർത്തതിന് ശേഷം മഴ ലഭിക്കുന്നു, തുടർന്ന് എത്തനോൾ ശുദ്ധീകരണം.മൃഗകലകൾ, കോശങ്ങൾ, ബാക്ടീരിയകൾ എന്നിവയിൽ നിന്ന് ആർഎൻഎ വേർതിരിച്ചെടുക്കാൻ ഈ രീതി അനുയോജ്യമാണ്.

③ അപകേന്ദ്ര കോളം ശുദ്ധീകരണ രീതി

സെൻട്രിഫ്യൂജ് കോളം പ്യൂരിഫിക്കേഷൻ രീതിക്ക് പ്രത്യേക സിലിക്കൺ മാട്രിക്സ് ആഡ്‌സോർപ്ഷൻ മെറ്റീരിയലുകൾ വഴി ഡിഎൻഎയെ പ്രത്യേകമായി ആഗിരണം ചെയ്യാൻ കഴിയും, അതേസമയം ആർഎൻഎയ്ക്കും പ്രോട്ടീനിനും സുഗമമായി കടന്നുപോകാൻ കഴിയും, തുടർന്ന് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ്, കുറഞ്ഞ ഉപ്പ് ഉയർന്ന പിഎച്ച് മൂല്യമുള്ള എല്യൂഷൻ എന്നിവ സംയോജിപ്പിച്ച് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിക്കാനും ശുദ്ധീകരിക്കാനും ഉയർന്ന ഉപ്പ് കുറഞ്ഞ PH ഉപയോഗിക്കുന്നു.ഉയർന്ന ശുദ്ധീകരണ സാന്ദ്രത, ഉയർന്ന സ്ഥിരത, ഓർഗാനിക് ലായകത്തിൻ്റെ ആവശ്യമില്ല, കുറഞ്ഞ ചെലവ് എന്നിവയാണ് ഗുണങ്ങൾ.പോരായ്മ, ഇത് ഘട്ടം ഘട്ടമായി കേന്ദ്രീകൃതമാക്കേണ്ടതുണ്ട്, കൂടുതൽ പ്രവർത്തന ഘട്ടങ്ങൾ.